大杯蕈原生质体菌株筛选的研究

对野生大杯蕈 (Clitocybemaxima)原生质体的分离再生及再生菌株的构建进行研究 ,以纤维素酶、溶壁酶、崩溃酶、β -葡萄糖苷酸酶的去壁效果最好 ,而新生酶 ,几丁质酶 ,蜗牛酶的去壁效果较差。 2种以上的酶液混合使用能提高去壁效果。酶解液在 0 .1%～2 .0 %浓度范围内原生质体释放量随酶解液的浓度升高几乎呈直线上升。酶解 3～ 5h释放的原生质体最多。酶解液pH值在 5.0～ 6.0范围内原生质体的产量较高。渗透压稳定剂以MgSO40 .6mol/L及甘露醇 0 .6mol/L处理原生质体释放量最高。培养 2～ 5d的菌丝酶解后原生质体释放量较多。培养基对原生质体释放量的影响不明显。大杯蕈的原生质体再生成活率仅 5%左右 ,所得 9个原生质体再生克隆菌株中多数菌株生长慢于对照 ,且菌丝体颜色较淡白 ,只有P0 4菌株无论母种、原种或栽培种的菌丝体生长速度均快于对照 ,且子实体的单菇重、菌盖重、菌盖直径、菌盖厚及盖柄比等均优于对照。