浙江蝮蛇毒碱性磷酯酶A的分离纯化及其性质的研究

采用DEAE-纤维素柱层析将浙江蝮蛇毒分离后,测得二个磷酯酶A活性峰。其中之一是在用平衡缓冲液最先洗脱下来的,为碱性磷酯酶A。另一是在含0.1MNaCl的缓冲液洗脱下来的,包含有一个酸性磷酯酶A和一个我们在前文已报道的突触前神经毒素。 本文报道的是碱性磷酯酶A的纯化及其性质的研究。碱性磷酯酶A进一步经磷酸-纤维素,CM-Sephadex C-50和Sephadex G-75柱层析纯化,得到一个在聚丙烯酰胺凝胶电泳上为一条区带的单一蛋白。其分子量为13,800左右,由121个氨基酸残基组成,富含半胱氨酸(14个),酪氨酸,甘氨酸和脯氨酸,等电点为9.3。 如同其他蛇毒磷酯酶A的性质相似,此碱性磷酯酶A显示很好的热稳定性。胰蛋白酶不能使它的酶活性完全丧失。