顺铂诱导的喉癌细胞凋亡及其对细胞周期的影响

目的探讨顺铂对喉癌Ｈｅｐ２细胞株诱导细胞凋亡的作用，为抗肿瘤药物的筛选和用药方式提供理论依据。方法体外培养的Ｈｅｐ２细胞与不同浓度顺铂作用２小时，利用流式细胞仪、荧光显微镜和ＤＮＡ凝胶电泳技术，研究不同时间细胞凋亡的发生、形态学改变和对细胞周期的影响。结果Ｈｅｐ２为贴壁生长细胞，顺铂作用后悬浮细胞增加，贴壁细胞中正常细胞占８６％～９６％，悬浮细胞中正常细胞占６％～１３％。随着顺铂浓度增加和培养时间延长，死亡细胞增加，０μｍｏｌ／Ｌ２４小时死亡细胞仅５％，而同样时间２０μｍｏｌ／Ｌ达１９％。死亡细胞中以凋亡为主，流式细胞仪图中出现“亚Ｇ１期”峰。顺铂作用后贴壁细胞体积增大，具有时间和药物浓度双相依赖性。悬浮细胞ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳呈现明显的梯度带，而贴壁细胞缺如。顺铂能造成细胞周期发生明显变化，低浓度（５～１０μｍｏｌ／Ｌ）时７２小时后细胞周期大致恢复正常，而２０～８０μｍｏｌ／Ｌ时细胞大部分阻滞在Ｇ２期。结论（１）顺铂造成Ｈｅｐ２细胞死亡的方式提示临床上应采取大剂量间歇性给药方式；（２）能否诱导细胞凋亡为筛选抗肿瘤药物的重要标准之一；（３）顺铂为细胞周期非特异性化疗药物。