反义RNA抑制存活素基因的表达对HeLa细胞的影响

为研究存活素 (survivin)基因在肿瘤细胞中的作用 ,通过RT PCR从HeLa细胞中克隆得到存活素cDNA的编码区 ,将其反向克隆到可诱导型表达载体pHC中 ,得到存活素反义RNA表达的载体 pHSC。通过脂质体的介导 ,将 pHSC导入HeLa细胞中 ,经G418(80 0nmol/L)筛选获得可以诱导表达存活素反义RNA的稳定细胞株HeLa pHSC。获得的细胞株在 2mmol/LZn2 +的诱导下 ,可以表达存活素反义RNA ,从而抑制存活素基因的表达。此时HeLa细胞的增殖受到抑制 ,对化疗药物的敏感性增加 ,在G2 /M期可以减缓细胞周期的进行性 ,这表明存活素对维持肿瘤细胞的增殖以及细胞周期的进行具有非常重要的作用。