顺铂耐药对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移和血管生成的影响

目的:探讨顺铂(cis-dichlorodiamine platinum,cDDP)耐药对人食管癌KYSE150细胞增殖、凋亡、迁移和血管生成的影响。方法:首先采用顺铂浓度递增的方法,历经10个月左右的时间成功建立了人食管癌顺铂耐药细胞系KYSE150/cDDP。采用MTT法测定其药物敏感性,并通过形态学观察、MTT实验、集落形成实验、DAPI染色、划痕愈合实验及小管形成实验比较顺铂耐药后食管癌细胞生物学行为的改变。结果:KYSE150细胞和KYSE150/cDDP细胞在形态上无明显差异;MTT实验结果显示,与KYSE150细胞相比,KYSE150/cDDP细胞对cDDP的耐药指数为6.35,细胞活力下降;集落形成实验结果显示,KYSE150/cDDP细胞的集落形成率为(15.00±3.05)%,而KYSE150细胞的集落形成率为(86.70±6.57)%;DAPI染色显示KYSE150/cDDP细胞的凋亡率为(0.63±0.09)%,而KYSE150细胞的凋亡率为(8.46±1.33)%;划痕愈合实验显示,与KYSE150细胞相比,KYSE150/cDDP细胞的划痕愈合能力更强,其迁移率较KYSE150细胞的迁移率高;小管形成实验显示,KYSE150/cDDP细胞的血管生成数为76.20±3.18,而KYSE150细胞的血管生成数为50.60±1.33;Western blot实验结果显示KYSE150/cDDP细胞中MMP-2和VEGFR2的表达均高于KYSE150细胞。结论:KYSE150/cDDP细胞具有耐药表型,耐药后生长缓慢,凋亡能力降低,迁移和血管生成能力增加,这可能是临床化疗失败的重要原因。