克隆人肥胖基因表达产物瘦素的分子量及特异性鉴定

目的对克隆的人肥胖 (OB)基因蛋白表达产物－瘦素 (Leptin)进行分子量及特异性鉴定。方法以商品 Leptin为阳性对照，同时设有未经热诱导的对照组 (OB-c)及克隆人肥胖基因重组表达产物试验组 (OB-h)。本文采用 SDS-PAGE对大肠杆菌所表达的蛋白产物进行分子量测定，同时用 Western blotting试验对其产物进行了特异性鉴定。结果经 SDS-PAGE检测，在 21.5～ 14.4 ku之间有一明显蛋白表达条带，对照组在相同的位置上未见明显蛋白表达。试验组 OB-h蛋白表达产物分子量的位置与商品 Leptin的位置基本一致。经 Western blotting试验，在硝酸纤维素膜上，商品 Leptin阳性对照及 OB-h试验组大约 16 ku的位置上可见到两条明显的与抗人 Leptin多克隆抗体呈特异性结合反应染色条带。结论人的 OB基因克隆后，在大肠杆菌中能特异的表达人的 Leptin蛋白质。