重组蛋白GDF-9对卵巢黄素化颗粒细胞增殖和凋亡的影响

被引:7
作者
马会明 [1 ,2 ]
李昕 [1 ]
王蒙蒙 [1 ]
王永峰 [1 ,3 ]
田洪成 [1 ]
王飞苗 [1 ,3 ]
王燕蓉 [1 ,2 ]
裴秀英 [1 ]
机构
[1] 宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室
[2] 宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系组织胚胎学教研室
[3] 宁夏医科大学总医院生殖医学中心
关键词
生长分化因子-9; 半胱氨酸蛋白水解酶3; 细胞外信号调节激酶1/2; 颗粒细胞; 卵巢;
D O I
10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2016.05.002
中图分类号
R714.8 [];
学科分类号
摘要
目的探讨重组生长分化因子-9(GDF-9)对人卵巢黄素化颗粒细胞周期及细胞增殖、凋亡的影响。方法收集因输卵管和(或)男性因素而接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗患者的卵泡液进行密度梯度离心,收集黄素化颗粒细胞,接种于M199培养基进行原代培养,实验组在M199培养基中添加100ng·m L-1GDF-9因子,对照组未添加GDF-9因子;培养48h后,用CCK-8试剂盒测定细胞增殖情况;用流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡;Western blot法检测裂解的半胱氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase-3)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化表达水平。结果原代培养的人黄素化颗粒细胞在培养第2~4天时处于分裂增殖高峰期,贴壁培养24h再添加GDF-9因子作用48h后,细胞周期检测结果显示,GDF-9使颗粒细胞周期表现为GO/Gl期的比例明显减少,S+G2/M期的比例明显增高(P<0.05)。细胞凋亡检测结果显示,颗粒细胞凋亡率显著减少(P<0.05)。Western blot检测发现,添加GDF-9使cleaved-caspase-3蛋白的相对表达量降低,磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的相对表达量显著增高(P<0.05)。结论重组GDF-9因子可促进颗粒细胞增殖,抑制颗粒细胞凋亡,其机制可能与活化ERK和抑制cleaved-caspase-3途径、调节细胞周期有关。
引用
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页码:484 / 489+474 +474
页数:7
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