大肠杆菌多药耐药基因AcrA的克隆及其原核表达

被引：5

作者：

马红霞

邓旭明

阎继业

张英霞

欧阳红生

机构：

[1] 吉林农业大学动物科技学院

[2] 解放军军需大学动物科技系

[3] 解放军军需大学动物科技系吉林长春

[4] 吉林长春

来源：

中国兽医学报 | 2003年 / 03期

关键词：

大肠杆菌; AcrA基因; 克隆; 原核表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

从大肠杆菌 Acr A的编码序列中设计引物 ,以大肠杆菌基因组为模板 ,扩增出 Acr A基因中约 6 91 bp的 c DNA片段 ,将所得片段与 p MD- 1 8T载体连接 ,转化到 DH5α大肠杆菌中 ,成功地筛选到阳性克隆 ,其质粒测序结果与文献报道一致。从阳性克隆中提取质粒 ,经 Hind 和 Bam H 酶解 ,回收 6 91 bp的目的片段 ,定向克隆到 p ET- 2 8a表达载体中 ,提取质粒 ,再次转化到 BL2 1 (DE3)中 ,成功地筛选出阳性克隆。经 IPTG诱导阳性菌 ,通过 SDS- PAGE检测出Acr A部分基因的表达

引用

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