新OPG/OCIF变体基因的克隆及其表达

从正常中国人肝细胞株Ｌ０２ 中抽提总ＲＮＡ， 利用ＲＴ ＰＣＲ 技术克隆了新破骨细胞抑制因子（ＯＰＧ／ＯＣＩＦ）ｃＤＮＡ， 同时从人胎肾细胞株２９３ 细胞中克隆了ＯＰＧ／ ＯＣＩＦ基因３′端基因组序列， 序列分析结果表明， 与国外文献报道相比较， 中国人肝细胞株中该ｃＤＮＡ３′端存在一个赭石型终止码突变， 从而使这一蛋白质比所报道的在Ｃ端少８ 个氨基酸残基。从２９３ 细胞克隆的基因组序列也同样存在这一突变。将ＯＰＧ／ ＯＣＩＦ基因在甲醇酵母表达系统中进行了高效表达， 得到了糖基化和非糖基化的两条条带， 其表达量总和为３０ ％ 以上。诱导表达时间越长， 糖基化蛋白比例越高。