水稻矮缩病毒第七号基因的序列分析及在大肠杆菌中的表达

被引：7

作者：

曲林

李毅

全胜

丁士友

SuzukiN

陈章良

机构：

[1] 北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室

[2] 秋田县农学院生物技术研究所植物基因工程实验室

[3] 北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室北京

[4] 北京德·蒙福特大学英国

[5] 北京

[6] 日本

来源：

微生物学报 | 1996年 / 05期

关键词：

水稻矮缩病毒; 第七号片段; 序列分析; 表达; 小核心蛋白;

D O I：

10.13343/j.cnki.wsxb.1996.05.003

中图分类号：

S435.111 [病害];

学科分类号：

090401 ; 090402 ;

摘要：

应用反转录-PCR技术合成并扩增了水稻矮缩病毒(RDV)中国福建分离物基因组第七号片段(S7)cDNA,将PCR产物克隆在载体 pBluescript SK(+)上,进行了亚克隆和序列分析。结果表明克隆片段全长1578bp,含有一个1518bp长的开放阅读框架(ORF),编码一个由506个氨基酸组成的理论分子量为56000的蛋白。该片段与RDV日本分离物基因组的相应片段相比,在核苷酸及氨基酸水平上的同源率分别为93.2％和94.1％。该片段编码的56000蛋白与同属的伤瘤病毒(WTV)基因组第七号片段编码的57000蛋白相比,在靠近N端的区域(aa61～aa141)有较高的氨基酸序列同源性。将RDV S7 cDNA克隆到原核表达载体 pBV221上,通过温度诱导在大肠杆菌中得到表达。表达产物占菌体可溶性总蛋白的13.73％。对表达产物进行了 Western blotting分析。本工作为进一步纯化RDV S7编码蛋白、分析其功能和转化水稻打下了良好基础。

引用

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