应用SYBR GreenⅠ实时荧光PCR溶解曲线检测鹌鹑源性成分

被引:5
作者
张慧霞 [1 ]
宗卉 [2 ]
吴建平 [1 ]
张利平 [1 ]
机构
[1] 甘肃农业大学动物科学技术学院
[2] 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心深圳市外来有害生物重点实验室
关键词
检测; 鹌鹑源性成分; SYBRGreenⅠ荧光PCR; 线粒体DNA;
D O I
暂无
中图分类号
S851.34 [动物检疫(兽医检疫)];
学科分类号
090602 ;
摘要
根据GenBank中的鹌鹑线粒体DNA(mtDNA)12S RNA基因保守序列,用Primer5.0软件设计了1对针对鹌鹑的特异性扩增引物,建立了一种检测鹌鹑动物源性成分的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。通过SYBRGreenⅠ实时荧光PCR反应,同时进行溶解曲线和Tm值分析。结果表明:只有鹌鹑样品在Tm值为82℃下有特异的溶解曲线峰,而参考物种鸽子、鸡、鸭、鹅、鸵鸟、鹧鸪、牛、羊、猪、马、驴、鱼和空白对照,则无特异的溶解曲线峰,说明该引物只对鹌鹑有特异性。测序结果表明,鹌鹑组织SYBR GreenⅠ实时荧光PCR产物的核苷酸序列与GenBank中检索到的相应序列相吻合;该方法的检测灵敏度为0.001%。
引用
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