以thyA基因为选择压力非抗性质粒载体的构建

被引：12

作者：

王春凤

秦泽荣

孙哲

黄瑜

何召庆

张莉

刘尚高

机构：

[1] 中国农业大学动物医学院!北京吉林农业大学动物科技学院长春

[2] 中国农业大学动物医学院!北京

[3] 中国农业大学动物

来源：

微生物学通报 | 2001年 / 02期

关键词：

thyA基因; 选择压力; 穿梭载体; 构建;

D O I：

10.13344/j.microbiol.china.2001.02.012

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

以干酷乳杆菌Ｌ．ｃａｓｅｉ３４１０３染色体ＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ技术扩增胸苷酸合成酶（Ｔｈｙｍｉｄｙ－ｌａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ｔｈｙＡ）基因，回收纯化。选择以红霉素抗性为选择压力的可以在大肠杆菌和乳酸菌中穿梭表达的质粒ｐＷ４２５ｅ为基本质粒，以ｔｈｙＡ基因取代红霉素基因，获得重组载体并鉴定。此重组载体可以对ｔｈｙＡ基因缺陷的大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉＸ５１和嗜酸乳杆菌ＤＯＭＬａＳ１０７进行功能弥补。进而构建了以ｔｈｙＡ基因为选择压力的非抗生素抗性穿梭表达载体，其大小为３７１６ｂｐ，并命名为ｐＷ４２５ｔ。

引用

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