柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系的建立与优化

被引：33

作者：

吴鑫 ^{[1
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雷天刚 ^{[2
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何永睿 ^{[2
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刘小丰 ^{[2
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许兰珍 ^{[2
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彭爱红 ^{[2
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陈善春 ^{[2
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机构：

[1] 西南大学园艺园林学院

[2] 西南大学柑桔研究所

来源：

分子植物育种 | 2008年 / 01期

关键词：

柑桔; SRAP; ISSR; 建立; 优化;

D O I：

暂无

中图分类号：

S666 [柑桔类];

学科分类号：

摘要：

通过对PCR反应程序、反应体系(DNA模板量、PCR反应体积、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶用量、引物量)、电泳检测方法的系统优化,建立了柑桔SRAP-PCR和ISSR-PCR体系;以此进行大规模引物筛选,从而建立了柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系。SRAP-PCR:25μL体系,模板DNA25ng,Tris-HCl10mmol/L,KCl50mmol/L,Mg2+1.2mmol/L,dNTP120μmol/L,Taq酶1.5U,引物0.4μmol/L,反应程序为94℃预变性5min,35个循环(94℃30s,47℃1min,72℃1min),72℃延伸10min;ISSR-PCR:25μL体系,模板DNA25ng,Tris-HCl10mmol/L,KCl50mmol/L,Mg2+1.6mmol/L,dNTP200μmol/L,Taq酶1U,引物0.8μmol/L。筛选出稳定性好、多态性高的24对SRAP引物和13条ISSR引物。

引用

页码：170 / 176

页数：7

共 14 条

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