树状多节孢原生质体的制备和再生

被引:6
作者
孙剑秋
于寒颖
张鹏
张彦丰
凌洪博
解玉红
周东坡
平文祥
机构
[1] 齐齐哈尔大学生命科学与工程学院!齐齐哈尔
[2] 齐齐哈尔大学生命科学与工
基金
黑龙江省自然科学基金;
关键词
树状多节孢; 原生质体; 制备; 再生; 紫杉醇;
D O I
暂无
中图分类号
Q949.320.2 []; Q944 [植物形态学];
学科分类号
071001 ;
摘要
研究了酶系组成、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂、pH值、培养基成分、培养方式、预处理、保护剂等因素对紫杉醇产生菌树状多节孢原生质体制备和再生的影响 .结果表明 :将树状多节孢在PDA液体培养基中静止培养 2~3d ,离心收集菌体 ,用 pH 5 .5~ 6 .0的 0 .7mol/L的NaCl配制成的含有 3%纤维素酶、2 %蜗牛酶和 1%溶菌酶的复合酶 ,30℃恒温酶解 9h ,原生质体制备率最高。但是考虑到原生质体的再生 ,以酶解 7h左右为宜 .获得的原生质体经过纯化 ,用 0 .7mol/LNaCl配制的PDA再生培养基进行双层平板培养法再生 ,原生质体的再生率最高 .本研究为以后通过原生质体诱变、转化、融合构建紫杉醇工程菌株奠定了基础 .图 3表 9参 16
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