猪生殖与呼吸综合征病毒ORF6片段的cDNA克隆及鉴定

被引:1
作者
任慧英
李文立
杨汉春
孙月平
机构
[1] 莱阳农学院动物科学系!山东莱阳
[2] 中国农业大学动物医学院!北京
关键词
猪生殖与呼吸综合征病毒; 克隆; 序列分析;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.2000.06.003
中图分类号
S852.651 [];
学科分类号
090601 ;
摘要
根据已发表的PRRSV基因组序列 ,设计并合成了 1对特异扩增ATCCVR 2 3 3 2株的ORF6基因的引物。以ATCCVR 2 3 3 2基因组为模板 ,通过RT PCR扩增出 5 86bp的cDNA产物。将该cDNA片段经T A连接插入 pGEM Teasy载体中 ,用重组质粒转化大肠埃希氏菌JM 10 9,获得重组质粒转化菌。对重组质粒DNA进行PCR及酶切鉴定 ,证明插入的DNA片段与PCR扩增的DNA片段大小相符。对整个ORF6进行序列分析 ,将测序结果与已发表的ATCCVR 2 3 3 2序列相比较 ,证实插入片段为PRRSVVR 2 3 3 2的ORF6片段的cDNA。
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