乌头汤对膝骨关节炎模型大鼠滑膜组织TLR4/NF-κB信号通路的影响

背景:前期研究表明乌头汤可有效抑制膝骨关节炎炎症反应,但具体机制尚不明确。目的:观察乌头汤对膝骨关节炎大鼠滑膜组织TLR4/NF-κB通路相关调节因子的影响,探讨乌头汤治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:SPF级雄性SD大鼠36只,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。实验方案经福建中医药大学动物实验伦理委员会批准。大鼠适应性喂养1周后,采用随机数字表法分为空白组、模型组和治疗组。模型组和治疗组均采用改良Hulth法复制双膝膝骨关节炎模型,术后1周空白组和模型组给予生理盐水,按照10 mL/(kg·d)的量进行灌胃;治疗组给予乌头汤,按照4.2 g/(kg·d)的药量进行灌胃。治疗8周后,取大鼠膝关节滑膜组织。ELISA法检测诱导型一氧化氮合酶、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6含量变化;Real-time PCR法检测TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κBp65mRNA表达;Westernblot法检测TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB p65蛋白表达。结果与结论:①ELISA结果显示,与模型组相比,乌头汤可有效抑制诱导型一氧化氮合酶、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达(P<0.01);②Real-timePCR结果表明,乌头汤能抑制TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB p65 mRNA表达(P <0.01);③Western blot结果与Real-time PCR结果趋势一致,即乌头汤能抑制TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB p65蛋白表达(P <0.01);④结果提示,乌头汤可通过调控TLR4/NF-κB信号通路,抑制膝骨关节炎滑膜炎症反应,从而起到治疗膝骨关节炎作用。