信号肽疏水性的提高促进青霉素G酰化酶分泌

被引：19

作者：

杨运桂

徐京宁

胡泰山

钱友存

杨胜利

龚毅

机构：

[1] 中国科学院上海生命科学研究院上海生物工程研究中心!上海

[2] 华东理工大学国家生物反应器工程重点实验室!上海

[3] 中国科学院上海生命科学

来源：

生物化学与生物物理学报 | 2000年 / 02期

关键词：

青霉素G酰化酶; 信号肽; 疏水核心; 疏水性;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q51 [蛋白质];

学科分类号：

摘要：

设计和合成了一段具有连续 10个亮氨酸强疏水核心的信号肽 (artificialsignalpeptide ,ASP) ,由EcoRI KpnI位点融合到青霉素G酰化酶 ( penicillinGacylase ,PAC)信号肽 (wildtypesignalpeptide,WTSP)的 - 4Pro位点 ,分别构建了PAC表达质粒 :pKKpacΔSP ,pKKpacWTSP ,pKKpacASP ,pETpacWTSP ,pETpacASP。ASP与WTSP均为 2 6个氨基酸 ,两者N端为MK ,C端均为PAVA。通过酶活性的测定及Western印迹分析 ,分别在tac,T7及氧调控表达系统中研究ASP和WTSP对PAC分泌的影响。结果表明 ,与WTSP相比 ,ASP对PAC酶活水平平均提高了约 63 % ,对PAC前体的分泌能力平均提高了约 4 1% ,通过提高信号肽疏水核心疏水性有效促进了青霉素G酰化酶的分泌。

引用

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