猪瘟病毒保护性抗原E2蛋白单抗的制备及其抗原表位的初步分析

被引：24

作者：

马刚

李作生

余兴龙

刘思国

涂长春

机构：

[1] 解放军军需大学军事兽医研究所

[2] 解放军军需大学军事兽医研究所吉林长春

[3] 吉林长春

来源：

中国兽医学报 | 2002年 / 02期

基金：

国家自然科学基金重大项目;

关键词：

猪瘟病毒; McAb; 纯化; 表位分析;

D O I：

10.16303/j.cnki.1005-4545.2002.02.012

中图分类号：

S852.651 [];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病毒 E2蛋白单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞株。它们的腹水效价在 1∶ 80 0～ 1∶ 2 10 0 0 0之间。抗体类型鉴定结果表明 ,A11、E3、H6、D5和 D8为 Ig M类型 ,B2为 Ig G类型。随后用蛋白 A凝胶层析法和 PEG沉淀法分别纯化了 Ig G和 Ig M单抗。对纯化单抗进行的抗原识别表位研究结果初步表明 ,6株单抗可能识别 3种不同的E2抗原表位。

引用

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