利用不同方法从深加工牦牛肉产品中提取基因组DNA效果的比较

被引:11
作者
何建文 [1 ,2 ,3 ]
韩建林 [4 ,2 ,3 ]
罗玉柱 [1 ]
机构
[1] 甘肃农业大学动物科学与技术学院
[2] 中国农业科学院国际家畜研究所畜禽牧草遗传资源联合实验室
[3] 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
[4] 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室
关键词
异硫氰酸胍法; 酚-氯仿抽提法; 试剂盒方法; 深加工牦牛肉产品; 基因组DNA;
D O I
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2010.10.036
中图分类号
S823 [牛];
学科分类号
摘要
为了从深加工牦牛肉产品中获得片段较大、数量较多的基因组DNA,以用于分子追溯的检测,尝试并系统地比较了异硫氰酸胍法、酚-氯仿抽提法和试剂盒提取法的提取效果。通过定量分析、凝胶电泳和PCR片段大小梯度扩增等手段,对利用3种方法提取的基因组DNA的数量和质量进行了比较。结果显示,利用酚-氯仿抽提法提取的基因组DNA质量不佳,异硫氰酸胍法和试剂盒提取法的提取效果相当,PCR可以扩增出730 bp左右的核外基因细胞色素b,而核内基因只能扩增出300bp左右的核基因DNA片段(内乳铁蛋白基因,271 bp;BoLA-DRB3基因,302 bp)。综合考虑提取时间、费用、数量和质量等各方面的因素,认为异硫氰酸胍法操作简便、快速、廉价、有效,是较好的从动物深加工肉产品中提取基因组DNA的方法。
引用
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