共 2 条
重组人骨形态发生蛋白-2/7融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达和初步活性测定
被引：7
作者：
刘礼初
梁国栋
杜靖远
付士红
陈飞
郑启新
肖宝筠
侯云德
机构：
[1] 同济医科大学附属协和医院外科!武汉
[2] 中国预防医学科学院病毒基因工程国家重点实验室!北京
[3] 同济医
来源：
关键词：
人骨形态发生蛋白-2/7融合基因;
构建和表达;
成骨样细胞;
碱性磷酸酶;
D O I：
暂无
中图分类号：
R364.3 [组织生长病理学];
学科分类号：
100104 ;
摘要：
构建重组人骨形态发生蛋白－２／７融合体， 研究其在大肠杆菌中的表达及生物学活性。利用ＤＮＡ 重组技术，将编码人骨形态发生蛋白－２ （ＢＭＰ－２） 成熟肽的０．３６ ｋｂ 基因片段与编码人骨形态发生蛋白－７ （ＢＭＰ－７） 成熟肽的０．４４ｋｂ 基因片段连接，得到重组人骨形态发生蛋白－２／７ 融合基因； 经测序鉴定后，将其克隆到表达载体ｐＢＶ２２２中，转化大肠杆菌ＤＨ５α， 温度诱导表达。表达蛋白经初步纯化后测定其对培养小鼠成骨样细胞增殖、分化及碱性磷酸酶活性的影响。克隆质粒转化的工程菌，经４２℃诱导４～６ ｈ 后，高效表达重组人骨形态发生蛋白－２／７， 在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上出现一新的蛋白带， 分子量约２９ ｋｕ，约占菌体总蛋白的２０％ ，表达蛋白以包涵体的形式存在，经初步纯化、裂解、复性后的ＢＭＰ－２／７ 蛋白具有促进成骨样细胞分化、增殖及增加碱性磷酸酶活性的作用。ＢＭＰ－２／７ 融合基因的构建和表达，可能提供一种全新的具有诱导成骨作用的蛋白
引用
收藏
页码：292 / 295
页数：4
相关论文