人血清胰岛素原单克隆抗体夹心酶联免疫法的建立

目的建立灵敏、特异的酶联免疫分析法测定人血清胰岛素原，用以评价胰岛β细胞功能。方法选用可同时与胰岛素原形成夹心结合的抗人C肽单抗和抗人胰岛素单抗，分别包被塑料微孔条作团相抗体和生物素化后作液相抗体，再以亲和素连接的辣根过氧化物酶放大检测信号，通过酶底物显色，判定胰岛素原浓度。结果方法的灵敏度为0．9pmol／L，曲线工作范围0．9～200pmol／L，批内批间变异系数分别小于8．9％和11．2％，平均回收率94％（82％～114％），稀释曲线和标准曲线平行，方法与高浓度的人胰岛素和C肽（5000pmol／L）均未见交叉反应。结论本方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便和无同位素污染等优点，适于大批量标本测定胰岛素原及其临床意义的深人探讨。