利用突变的绿色荧光蛋白基因为标记构建新型克隆载体

被引：5

作者：

董越梅

李久蒂

朱至清

机构：

[1] 中国科学院植物研究所

来源：

植物学报 | 1999年 / 05期

关键词：

绿色荧光蛋白基因，GFPmut2，pBluescriptSK（＋），克隆载体;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q785 [转化及克隆];

学科分类号：

摘要：

将三位点替换突变的绿色荧光蛋白（ＧＦＰ＿Ｓ６５Ｔ、Ｖ６８Ｌ、Ｓ７２Ａ）基因插入到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋）的ＸｂａⅠ和ＳａｃⅠ之间，构建为新型的克隆载体ｐＧｒｅｅｎＬＤ。此质粒载体在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达后使菌落在日光下呈现黄绿色，而在长波紫外光照射下呈现亮绿荧光，当外源ＤＮＡ片段插入该载体的多克隆位点使ｇｆｐ基因表达受阻时，转化的Ｅ．ｃｏｌｉ菌落为白色。因此可以用Ｅ．ｃｏｌｉ菌落黄绿色／绿色荧光的消失作为检测指标来筛选含有重组质粒的克隆。

引用

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