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乙型肝炎病毒表面抗原基因在中国地鼠卵巢细胞中的高效表达及纯化抗原免疫原性的研究
被引:23
作者:
任贵方
张一鸣
阮薇琴
杨安道
梅雅芳
平立华
杨芙蓉
王申
温晓燕
朱既明
机构:
[1] 中国预防医学科学院病毒学研究所
来源:
关键词:
重组DNA;
转化细胞系;
乙型肝炎病毒表面抗原;
免疫原性;
D O I:
10.13242/j.cnki.bingduxuebao.000364
中图分类号:
学科分类号:
摘要:
本文报告了两个拷贝的adr亚型HBs基因的pSV2质粒组建,其中一个拷贝只含S基因,受SV40早期启动子的直接控制,另一个拷贝连接于pSV2质粒dhfr基因下游,含有前S和S基因及其本身的启动子,用此重组质粒转化CHO-dhfr-细胞,经选择,获得了高效表达HBsAg的CHO-32-C23及CHO-Ⅱ-5细胞系,最佳培养条件及HBsAg分泌动态的研究结果表明,CHO-Ⅱ-5系细胞分泌HBsAg的最佳条件是37℃培养,培养基中加2%小牛血清,每日收换液;用5%小牛血清,每48小时收换液则次之,但较实用,转瓶培养产量约2.μg/ml,将CHO-32-C23细胞系产生的液体初步纯化,在聚丙烯酰胺凝胶上显示23k和27k蛋白带,用其免疫NIH小鼠,EDSO为0.119μg,对照血源菌ED50为0.083μg,二者的免疫原性近似。
引用
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页码:313 / 320
页数:8
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