酵母整合型载体的构建及其功能分析

被引：6

作者：

武志强 ^{[1
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贾耐兵 ^{[1
]}

李娜 ^{[2
]}

王瑞菊 ^{[1
]}

马百成 ^{[1
]}

王翠艳 ^{[1
]}

李明刚 ^{[1
]}

机构：

[1] 南开大学生命科学学院分子生物学研究所

[2] 天津出入境检验检疫局

来源：

生物学通报 | 2008年 / 05期

关键词：

酿酒酵母; rDNA; 整合载体; 磷酸丙糖异构酶; 绿色荧光蛋白;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q782 [基因载体];

学科分类号：

摘要：

选取酿酒酵母基因组rDNA序列中25S和5S rDNA之间的一段约2.2 kb序列作为整合栽体同源重组到酿酒酵母基因组中的靶位点,PCR扩增得到该段序列左右2段大小分别为865 bp和1 350 bp的片段,将其与URA3、磷酸丙糖异构酶启动子和终止子序列依次克隆入pUC18中,构建成整合型栽体pNK。以绿色荧光蛋白基因为报告基因,荧光显微镜下观察到酿酒酵母菌株INVSc1转化子发出较强荧光,Southem杂交产生目的条带,这些结果表明载体pNK具有整合并表达外源基因功能。通过对转化子连续培养证明构建的整合型栽体的稳定性较高。

引用

页码：47 / 50

页数：4

共 10 条

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