HPV18 E6E7反义荧光真核表达载体的构建及其在宫颈癌HeLa细胞中的表达

被引：1

作者：

司马妮

王薇

田训

罗爱月

李春晓

王娟

卢运萍

王世宣

马丁

机构：

[1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科

来源：

肿瘤防治研究 | 2007年 / 06期

关键词：

人乳头瘤病毒18型; E6/E7; 反义; EGFP; 宫颈癌;

D O I：

暂无

中图分类号：

R737.33 [子宫肿瘤];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的构建HPV18型E6E7反义荧光真核表达载体,并观察其对宫颈癌HeLa细胞中HPV18 E6和E7基因表达的影响,探索反义技术用于治疗临床HPV感染及宫颈癌的可能性。方法以HPV18型全基因质粒为模板,PCR法扩增HPV18型E6E7区716bp片段,利用基因重组技术将目的片段反向插入荧光真核表达载体pEGFP-C1,EcoR I酶切并测序鉴定;采用脂转法将重组质粒pEGFP-HPV18 E6E7as(EGFP-18AS)转染宫颈癌HeLa细胞株,通过RT-PCR及western blot检测细胞中E6、E7 mRNA和蛋白的表达。结果成功构建HPV18E6E7反义荧光真核表达载体EGFP-18AS,经脂质体转染HeLa细胞,48h后在荧光倒置显微镜下可见明显的绿色荧光,且细胞中E6、E7 mRNA及蛋白表达水平均明显下调。结论反义荧光真核表达载体可以有效的抑制HPV18E6、E7癌基因的表达,为治疗HPV感染和宫颈癌提供了一种新的方法。

引用

页码：402 / 404

页数：3

共 8 条

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