改变半抗原与载体蛋白的连接桥对提高水杨酸ELISA灵敏度的影响

目的：探讨水杨酸（ＳＡ）与载体蛋白间连接桥的改变对识别ＳＡ抗体的产生及ＳＡＥＬＩＳＡ灵敏度的影响。方法：将ＳＡ、４ 氨基水杨酸、５ 氨基水杨酸分别用不同的方法与载体蛋白相偶联，从而在ＳＡ苯环的Ｃ４、Ｃ５两个不同位点合成了３种免疫原：ＳＡ（Ｃ５） Ｎ＝Ｎ ｐ ＡＨＡ ＢＳＡ（Ａ）、ＳＡ（Ｃ４） Ｎ＝ＣＨ （ＣＨ２）３ ＣＨ＝Ｎ ＢＳＡ（Ｂ）和ＳＡ（Ｃ５） ＮＨ ＣＨ２ ＮＨ ＢＳＡ（Ｃ）及４种包被物：ＳＡ（Ｃ５） Ｎ＝Ｎ ｐ ＡＨＡ ＯＶＡ、ＳＡ（Ｃ４） Ｎ＝ＣＨ （ＣＨ２）３ ＣＨ＝Ｎ ＯＶＡ、ＳＡ（Ｃ５） Ｎ＝ＣＨ （ＣＨ２）３ ＣＨ＝Ｎ ＯＶＡ、ＳＡ（Ｃ５） ＮＨ ＣＨ２ ＮＨ ＯＶＡ。免疫新西兰白兔制备抗体，用ＥＬＩＳＡ法检测。结果：获得针对Ａ和Ｃ的两种多克隆抗体，后一种能专一识别游离态水杨酸，改变包被物中连接桥的结构可提高ＳＡＥＬＩＳＡ的检测灵敏度，故选用ＳＡ（Ｃ５） Ｎ＝ＣＨ （ＣＨ２）３ ＣＨ＝Ｎ ＯＶＡ建立了ＳＡＥＬＩＳＡ。结论：ＳＡ与载体蛋白间连接桥的改变对识别ＳＡ抗体的产生和ＳＡＥＬＩＳＡ的灵敏度有很大影响。