AiiA蛋白的可溶性表达及其抗菌活性研究

被引：8

作者：

杨梅 ^{[1
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张锋 ^{[1
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林彬辉 ^{[2
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苏新华 ^{[2
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郭丽清 ^{[2
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黄志鹏 ^{[2
]}

关雄 ^{[2
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机构：

[1] 福建师范大学生命科学学院

[2] 福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室

来源：

分子细胞生物学报 | 2008年 / 41卷 / 06期

关键词：

aiiA基因; 可溶性表达; 分离纯化; 植物病害防治;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

AHLs是革兰氏阴性细菌在增殖过程中产生的一类信号分子,与其致病性密切相关。AiiA蛋白作为一种胞内解酯酶。能水解致病菌产生的AHLs分子,使内酯环开环后不能再激活某些胞外酶的表达,从而极大地减弱了细菌的致病性。本研究从苏云金芽孢杆菌LLB15中分离编码aiiA基因的质粒DNA,用PCR方法克隆AiiA基因,并利用pET载体构建6-His融合表达质粒pET29a-aiiA,转化E.coli BL21(DE3)菌株,并筛选得到E.coli BL21(DE3)-pET29a-aiiA工程菌。在20℃的低温和0.8 mmol/L IPTG条件下,经25 h的诱导表达,获得了54.4μg/mL可溶性AiiA蛋白。通过镍柱亲和层析,在国内外首次纯化了带6-His标记的AiiA蛋白。水解活性和抗病性检测表明。该蛋白能水解AHLs分子。对胡萝卜欧文氏软腐病菌具有较强的抗病作用。

引用

页码：465 / 472

页数：8

共 10 条

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