磷酸化细胞外信号调节激酶1/2定位于成骨细胞的局部黏附时需要Src活性

被引：4

作者：

胡志毅 ^{[1
]}

张宁 ^{[1
]}

殷国勇 ^{[1
]}

范卫民 ^{[1
]}

任永信 ^{[1
]}

蔡卫华 ^{[1
]}

董天华 ^{[2
]}

机构：

[1] 南京医科大学第一附属医院骨科

[2] 苏州大学附属第一医院骨科

来源：

中国修复重建外科杂志 | 2007年 / 11期

关键词：

Src; 磷酸化细胞外信号调节激酶1/2; 血小板源性生长因子; 成骨细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q26 [细胞生物化学];

学科分类号：

071013 [干细胞生物学];

摘要：

目的探讨血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)刺激成骨细胞,对磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylation extracellular signal-regulated kinase1/2,pERK1/2)位置的影响。方法出生3d清洁级健康小鼠10只,雌雄不拘,体重6～9g。取小鼠颅骨,分离培养原代成骨细胞。取第6代成骨细胞,1%血清培养液培养12h后,随机分成经10μmol/L PP2处理30min组(实验组)和未处理组(对照组),每组再随机分成2个亚组:其中一组用PDGF(20ng/ml)刺激10min,另一组不用PDGF刺激,采用免疫组织化学染色检测pERK1/2分布。另取第6代成骨细胞,当细胞生长至80%融合时,用细胞刮随机分成2组,一组用10μmol/L PP2预处理30min(实验组),另一组不用PP2作用(对照组),再用20ng/ml PDGF培养12h,采用划痕愈合法检测PP2对成骨细胞在PDGF刺激下迁移能力的影响。另取第6代成骨细胞,调整细胞浓度1×106/ml,随机分成2组,分别经DMSO(对照组)和10μmol/L PP2(实验组)预处理30min,每组再随机分成2个亚组:其中一组用PDGF(20ng/ml)刺激10min,另一组不用PDGF剌激,采用Western blot检测细胞骨架蛋白内pERK1/2活性。结果免疫荧光染色结果显示,PDGF促进pERK1/2定位于成骨细胞的局部黏附和细胞核内;而PP2显著抑制了由PDGF刺激引起的pERK1/2定位于成骨细胞的局部黏附,但并不影响pERK1/2定位于细胞核内。细胞划痕愈合实验显示,PP2明显抑制了由PDGF所诱导的成骨细胞迁移。Western blot检测结果显示,PP2明显抑制了由PDGF所诱导的成骨细胞局部黏附内ERK1/2的磷酸化。结论PDGF通过激活Src活性,促进pERK1/2定位于成骨细胞的局部黏附内;PP2通过抑制pERK1/2定位于成骨细胞的局部黏附,从而抑制由PDGF所诱导的成骨细胞迁移。

引用

页码：1179 / 1183

页数：5

共 9 条

[1]

Modulation of ERK 1/2 and p38 MAPK signaling pathways by ATP in osteoblasts:: Involvement of mechanical stress-activated calcium influx, PKC and Src activation [J].