诱导兔骨髓间充质干细胞定向分化为成骨细胞和软骨细胞的研究

目的 :探讨兔骨髓间充质干细胞 (MSC)体外分离培养、增殖 ,以及向成骨细胞和软骨细胞定向诱导分化的条件 ,为骨、软骨缺损的修复和重建提供种子细胞。方法 :抽取兔髂骨及胫骨的骨髓液 ,经密度梯度离心法及塑料板贴壁培养法分离纯化出MSC ,并增殖。对第二代MSC进行成骨矿化诱导 ,测定其碱性磷酸酶 (ALP)活性及成骨矿化情况。并对第二代MSC进行诱软骨特定培养液诱导 ,对诱导细胞进行甲苯胺蓝染色 ,测定诱导后的软骨细胞表型。结果 :MSC为梭型的成纤维细胞样贴壁生长 ,增殖能力强。在成骨诱导剂作用下 ,MSC具有成骨能力 ,诱导后ALP活性明显提高 ,并且出现矿化结节沉积。在成软骨诱导剂作用下 ,可见细胞由成纤维样的梭形变为椭圆形及肾形 ,并分泌基质 ,甲苯胺蓝染色呈阳性 ,表现为软骨细胞分化特点。结论 :在特定诱导条件下 ,兔骨髓MSC体外可定向诱导分化为成骨细胞和软骨细胞 ,可用于组织工程骨和软骨组织的修复和重建。