单味中药骨碎补对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡作用的实验研究

目的:利用细胞、分子生物学技术,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹(Western-blot)检测方法,观察其对实验性兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响并进行理论分析。方法:将24只成年新西兰大耳白兔,随机分为6组,空白组6只,模型组6只,治疗组(骨碎补组)6只,对照组(维固力组)6只。兔左后肢伸直位管型石膏固定6周得到兔膝OA的模型。用药4周后,以耳缘静脉空气栓塞法处死各组动物取下每只家兔左后肢股骨髁,取下的关节软骨分成两部分,股骨髁的一部分用于RT-PCR检测;另一部分用于Western blot检测。采用SPSS 13.0软件包对RT-PCR和Western Blot结果进行方差分析和Pearson相关分析,P<0.05有统计学意义。结果:(1)RT-PCR检测结果:模型组较空白组的TNF-αmRNA、Caspase-3mRNA表达水平差异有显著性(P<0.05));对照组较模型组的TNF-αmRNA、Caspase-3mRNA表达水平差异有显著性(P<0.05);治疗组较模型组的TNF-αmRNA、Caspase-3mRNA表达水平差异有显著性(P<0.05);治疗组较对照组的TNF-αmRNA、Caspase-3mRNA表达差异无显著性。(2)Western blot检测结果:模型组较空白组的TNF-α、Caspase-3表达水平差异有显著性(P<0.05);对照组较模型组TNF-α、Caspase-3蛋白表达水平差异有显著性(P<0.05);治疗组较模型组的TNF-α、Caspase-3蛋白表达水平差异有显著性(P<0.05);治疗组较对照组的TNF-α、Caspase-3蛋白表达差异无显著性。结论:单味中药骨碎补对防治OA有重要作用。