SDS-PAGE法分离和表征明胶中不同构象

仔细分析已发表的文献表明,迄今为止用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定明胶分子量分布仅限于分出<α、α1、α2、和β组份,而γ及>γ的组份未能检出,也就是说,分子量大约30万以上的组份未能进入凝胶板内(以下简称“入板”)。这对明胶构象的全分析和对明胶质量的判断都是一个严重的缺陷。本文主要探讨和研究了γ及>γ组份的入板问题。所采取的办法有:有效地控制丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺(交联剂)的相对含量,选择合适的交联度梯度和孔径大小,使之既适用于α和β组份迁移,也能让γ及>γ的组份入板。此外,在小交联度和大孔径情况下,还能符合凝胶板对凝胶强度的基本要求。实验结果表时,操作过程缩短,分辨率改善,成功地得到了从几万到30万以上的分子量分布的明胶全部构象的图谱。