水杨酸诱导湖北海棠全长cDNA文库的构建及应用

被引：19

作者：

张计育 ^{[1
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渠慎春 ^{[1
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董畅 ^{[1
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高志红 ^{[1
]}

乔玉山 ^{[1
]}

章镇 ^{[1
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机构：

[1] 南京农业大学园艺学院

[2] 黑龙江省农业科学院园艺分院

来源：

西北植物学报 | 2010年 / 30卷 / 08期

关键词：

湖北海棠; 水杨酸; cDNA文库; MhPGIP;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q943.2 [植物基因工程];

学科分类号：

摘要：

以湖北海棠为材料,经水杨酸处理后,用改良CTAB法提取总RNA,纯化后构建全长cDNA文库,并进行PGIP基因的克隆.结果表明:(1)提取的总RNA无降解,无污染;mRNA弥散带主要集中在500～2 000 bp左右,没有rRNA残留.(2)ds cDNA弥散带主要分布于300～2 000 bp之间,PCR验证后片段大小分布于200～2 000bp之间,说明合成ds cDNA质量较好,成功地构建了全长cDNA文库.(3)通过PCR从该cDNA文库中克隆了PGIP基因,命名为MhPGIP,GenBank登录号为FJ449708;其核苷酸序列及推导氨基酸序列与苹果的一致性分别为98%和97%,该序列含有两个串联的亮氨酸重复序列.综上所述,构建的全长cDNA文库质量很好,该文库的建成可以用于今后抗病新基因的挖掘、克隆和利用,为苹果抗病机理的研究奠定基础.

引用

页码：1527 / 1533

页数：7

共 9 条

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