转甜菜碱醛脱氢酶基因油菜的获得及其耐盐性研究

被引:7
作者
韩德俊 [1 ]
陈耀锋 [1 ]
李春莲 [1 ]
郭东伟 [1 ]
李振岐 [2 ]
机构
[1] 西北农林科技大学农学院
[2] 西北农林科技大学植保学院
关键词
甘蓝型油菜; 遗传转化; 甜菜碱醛脱氢酶; 耐盐;
D O I
暂无
中图分类号
S565.4 [油菜籽(芸薹)];
学科分类号
0901 ;
摘要
以9个甘蓝型油菜(Brassica nupas L.)材料为受体,分别以其子叶和下胚轴为外植体,利用农杆菌将来自山菠菜的BADH基因导入甘蓝型油菜,研究了转化植株的抗盐性。结果表明,依据对农杆菌侵染的反应,参试品种可划分为三种类型:抗性类型(resistant type,R);超敏感类型(supper susceptive type,SS)和中间类型(middletype,M)。R型外植体切口易发生过敏反应导致失去再生能力;SS型外植体极易受农杆菌快速增殖影响,最终导致整体褐化死亡;只有M型外植体还保留部分再生能力,可产生少量不定芽。通过改进培养方式可提高外植体在农杆菌胁迫下的芽发生频率,在无菌滤纸上进行共培养,不仅能降低“玻璃化”现象,还能延长共培养时间,为外植体细胞的再分化提供了时间保障。分化培养基中加入3~6 mg/L AgNO3可减轻外植体褐化程度,提高不定芽分化率。PCR分析和BADH活性检测发现,有部分转化体BADH酶活性明显高于对照,表明转基因植株在盐胁迫下外源BADH基因已表达,转基因植株能够在0.5%NaCl培养基上正常生长,而对照在相同的培养基上生长缓慢且生根困难。
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