共 1 条
[1]
核苷酸还原酶小亚基反义寡核苷酸对人绒毛膜癌细胞体外生长的影响
被引：7
作者：
崔金全
石一复
周怀君
机构：
[1] 浙江大学医学院附属妇产科医院妇科,浙江大学医学院附属妇产科医院妇科,浙江大学医学院附属妇产科医院妇科杭州,现在郑州大学第二附属医院妇产科,杭州,杭州
来源：
关键词：
核苷酸还原酶类;
寡核苷酸类,反义;
绒毛膜癌;
肿瘤细胞,培养的;
D O I：
暂无
中图分类号：
R737.33 [子宫肿瘤];
学科分类号：
100112 [医学生物化学与分子生物学];
摘要：
目的 探讨核苷酸还原酶小亚基 (RRM2 )反义寡核苷酸 (ASODN)对人绒毛膜癌细胞株JAR细胞体外生长的影响。方法 以脂质体为载体 ,将人工合成的分别位于RRM2mRNA核苷酸序列第 6 2 6～ 6 4 5 (编码区 )和第 15 72～ 15 91(3′端非编码区 )位点且全程硫代修饰的两条ASODN片断 (前者称ASODN1,后者称ASODN2 )导入JAR细胞中 ,用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测细胞存活率 ,免疫印迹法和RT PCR技术检测ASODN对RRM2蛋白和mRNA表达的影响。结果 (1)ASODN1对JAR细胞的抑制作用呈剂量和时间效应 :10 0nmol/LASODN1作用后JAR细胞的生长抑制率为 (8 10±1 18) % ;随着ASODN1浓度的增加细胞生长抑制作用增强 ,ASODN1浓度为 4 0 0nmol/L时其细胞生长抑制率为 (2 7 70± 3 6 8) % ,与ASODN1浓度为 0时 [(0 16± 0 12 ) % ]比较 ,差异有极显著性 (P =0 0 0 0 )。 2 0 0nmol/LASODN1作用 2 4h后 ,细胞生长抑制率为 (13 98± 1 4 5 ) % ;4 8h[为 (18 90±4 85 ) % ]达到高峰 ,72h抑制作用 [为 (19 5 3± 5 0 0 ) % ]不再明显增强 ,分别与作用时间为 0时 [(0 16± 0 31) % ]比较 ,差异均有极显著性 (P =0 0 0 0 )。 (2 )JAR细胞RRM2蛋白和mRNA的表达 :2 0 0nmol/LASODN1作用 12h ,RRM2蛋白和mRNA表达水平开始下降
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