转基因大豆MON89788转化体特异性定性PCR检测(摘要)(英文)

被引：8

作者：

李飞武

李葱葱

董立明

邢珍娟

张明

机构：

[1] 吉林省农业科学院农业部转基因植物环境安全监督检验测试中心

来源：

AgriculturalScience&Technology | 2010年 / 11卷 / 03期

关键词：

转基因大豆; MON89788转化体; 定性PCR;

D O I：

10.16175/j.cnki.1009-4229.2010.03.023

中图分类号：

S565.1 [大豆];

学科分类号：

0901 ;

摘要：

[目的]建立MON89788大豆转化体特异性定性PCR检测方法。[方法]利用TAIL-PCR技术分离MON89788大豆的3′端旁侧序列,据此序列设计3条特异性引物用于旁侧序列的扩增。经过3轮PCR扩增,获得特异性扩增产物,将此产物回收后克隆到pMD-18T载体上测序,所得序列用Vector NTI分析,并提交NCBI进行序列比对。并对该方法的特异性和灵敏度进行测试。[结果]获得了1 142 bp的3′端旁侧序列。经Blast检索比对,该序列包括2部分,1 ～618 bp为载体序列(E9终止子部分序列和LB序列),619 ～1 142 bp为大豆基因组序列;依据该序列建立的PCR检测方法能特异性地从MON89788大豆中扩增出170 bp的产物,检测灵敏度达到0.05%,约为40个起始模板拷贝。[结论]该研究建立的方法特异性强、灵敏度高,可适用于MON89788大豆检测。

引用

页码：82 / 86

页数：5

共 12 条

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