鼠肝癌细胞的热休克蛋白诱导及其抗瘤机理研究

目的摸索鼠肝癌Ｈ２２细胞膜热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）最适的诱导条件，并明确其体内外的抗瘤机理。方法用免疫荧光及ＦＣＭ法检测热休克Ｈ２２细胞膜ＨＳＰ７０蛋白的动态表达。并用ＭＭＣ灭活、热休克后的Ｈ２２细胞作抗原进行体内肿瘤免疫保护试验及体外肿瘤杀伤试验。结果小鼠肝癌Ｈ２２细胞经４２℃、４３℃热休克１２小时后，其胞膜ＨＳＰ７０蛋白表达率分别达到５９．５％，９６．８％。均较对照组显著增高（Ｐ＜０．００１）。用４３℃休克１２小时的Ｈ２２细胞免疫的Ｃ３Ｈ小鼠能抵抗同种野生型肿瘤细胞的攻击，其肿瘤发生率比野生型Ｈ２２免疫组及未免疫组均显著降低，分别为１／９、７／８和８／８。同时小鼠荷瘤生存期显著延长，中位生存期分别为＞９０天，７３．５天及３９．５天。体外杀伤试验表明，经热休克Ｈ２２诱导７天后的Ｃ３Ｈ脾淋巴细胞对热休克型Ｈ２２细胞杀伤率高达６３．３８％（４３℃，２小时）和６７．８４％（４３℃，１２小时），且这种杀伤活性可被抗鼠ＨＳＰ７０的单抗所阻断。分析效应细胞的表型发现，ＣＤ４＋、ＣＤ８＋淋巴细胞在整个体外诱导过程中并不增加，而ＴＣＲγδ＋淋巴细胞随诱导时间的延长与杀伤活性同步增加，诱导第７天为３０．４３％，第１４天