抗细胞膜DNA抗体检测方法的建立及对系统性红斑狼疮诊断价值的临床应用研究

目的应用间接免疫荧光法（IIF）检测抗细胞膜DNA（cmDNA）抗体,探讨抗cmDNA抗体对系统性红斑狼疮（SLE）的诊断价值。比较以人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL60为底物,抗cmDNA抗体在SLE中的检测效果。方法选取306例SLE患者,192例非SLE疾病对照组,包括脊柱关节病（SpA）52例,类风湿关节炎（RA）70例,原发干燥综合征（pSS）30例,其他结缔组织病（CTD）40例。50名健康志愿者作为对照组。采用IIF法观察培养的人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL60的细胞膜的荧光图形;用IIF法检测抗核抗体、抗双链DNA（dsDNA）抗体;联合应用免疫双扩散法和蛋白印迹法检测抗Sm抗体,酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定抗核小体抗体（AnuA）。配对资料比较用McNemarχ2检验,相关性分析采用Spearman相关及Logistic回归分析。结果以Raji及HL60 2种细胞株为底物检测SLE患者抗cmDNA抗体,敏感性分别为72.5%、76.1%,特异性分别为91.7%、86.8%,差异均无统计学意义（P>0.05）。抗cmDNA抗体的敏感性明显高于抗Sm抗体及抗dsDNA抗体,差异有统计学意义（P<0.01）;特异性与抗dsDNA抗体相似（P>0.05）,但低于抗Sm抗体及AnuA（P<0.01）。抗cmDNA抗体分别与抗dsDNA抗体、抗Sm抗体及AnuA联合检测在SLE诊断中的敏感性均明显高于上述自身抗体单独检测,差异有统计学意义（P<0.05）。抗cmDNA抗体与SLE患者的黏膜溃疡之间有相关性（OR=2.343,P=-0.029）。抗cmDNA抗体与红细胞沉降率（ESR）有相关性（OR=1.031,P=-0.012）。抗cmDNA抗体与SLE疾病活动指数（SLEDAI）评分无相关性（r=0.070,P=0.600）。本文研究还证实Raii细胞株较HL60细胞株更易复苏、荧光图形亮度更强,表达效果更好。结论抗cmDNA抗体对SLE诊断的敏感性高,特异性强,可能成为SLE诊断的相对特异性抗体之一。抗cmDNA抗体与抗dsDNA抗体、抗Sm抗体及AnuA联合检测可提高对SLE诊断的敏感性。选择Raii细胞株为底物检测抗cmDNA抗体较HL60细胞株更有优势。