板栗RAPD影响因素的研究

被引：11

作者：

项艳

高健

张晓渡

朱谦

朱苏文

程备久

不详

机构：

[1] 安徽农业大学森林利用学院!安徽合肥

[2] 安徽省林业厅种苗处!安徽合肥

[3] 安徽农业大学生物工程系!安徽合肥

来源：

经济林研究 | 2001年 / 01期

关键词：

板栗; RAPD; 影响因素; 优化;

D O I：

10.14067/j.cnki.1003-8981.2001.01.005

中图分类号：

S664.2 [栗]; Q751 [];

学科分类号：

090201 ; 071007 ;

摘要：

稳定的 RAPD反应体系是进行 RAPD分析的关键。分别测试了模板 DNA、d NTP、Mg2 +、引物、Taq DNA聚合酶浓度和变性时间、退火温度及时间、延伸时间、循环次数等对反应结果的影响。通过实验确定了板栗最佳的 RAPD反应条件。在 5 0 μl反应体系中含有 5 0 ng模板、0 .74μmol/L随机引物、180 μmol/L d NTP、3 U Taq DNA聚合酶、2 .0 mmo1/LMg Cl2 。反应扩增程序为 :94℃预变性5 min,40次热循环 ,每个循环包括 :94℃变性 3 0 sec,3 6℃退火 45 sec,72℃延伸 90 sec,最后 72℃终延伸 7min。按照优化的 RAPD条件进行的重复实验 ,重现性良好。

引用

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页数：4

共 4 条

[1]

PCR技术操作和应用指南[M]. 人民军医出版社 , 林万明等编写, 1993

[2]

Potential taxonomic use of random amplified polymorphic DNA (RAPD): a case study in Brassica[J] . T. Demeke,R. P. Adams,R. Chibbar.Theoretical and Applied Genetics . 1992 (7)

[3]

Use of single-primer DNA amplifications in genetic studies of peanut ( Arachis hypogaea L.)[J] . Tracy Halward,Tom Stalker,Elizabeth LaRue,Gary Kochert.Plant Molecular Biology . 1992 (2)

[4] PARENTAGE DETERMINATION IN MAIZE HYBRIDS USING THE ARBITRARILY PRIMED POLYMERASE CHAIN-REACTION (AP-PCR) [J].

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SOBRAL, BWS .

THEORETICAL AND APPLIED GENETICS, 1991, 82 (04) :473-476

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