补阳还五汤对曲妥珠单抗干预后的心肌细胞H9C2的调控作用

【目的】观察补阳还五汤对曲妥珠单抗导致的心肌细胞H9C2活性抑制及SHP-1活性的影响,通过转染SHP-1和SHPC/S-1质粒后观察补阳还五汤的干预效果,从而探讨其调控机制。【方法】构建真核表达载体pc DNA3.1(+)-SHP-1和pc DNA3.1(+)-SHPC/S-1,利用脂质体转染法转染大鼠心肌H9C2细胞,经G418筛选阳性克隆,阳性克隆细胞在曲妥株单抗中维持生长。采用定量RT-PCR法检测SHP-1基因及SHPC/S-1基因在大鼠心肌H9C2细胞中的稳定表达情况,采用磷酸酶活性分析补阳还五汤对心肌细胞中SHP-1的调控作用,并通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法进一步观察加入补阳还五汤后细胞的凋亡情况。【结果】测序证明真核表达载体构建成功,并且可以在曲妥珠单抗干预下的心肌细胞H9C2中稳定表达,磷酸酶活性检测证实磷酸酶活性最高的是H9C2-SHP-1细胞组,经补阳还五汤干预后活性显著下降(P<0.05);MTT法观察进一步证实加入补阳还五汤后的H9C2-SHP-1细胞的凋亡率较未加补阳还五汤组的细胞显著降低(P<0.05)。【结论】补阳还五汤可以改善曲妥珠单抗对心肌细胞的抑制作用,并可影响心肌细胞中SHP-1基因的表达,为以后进一步探讨曲妥珠单抗所致的心脏毒性的治疗打下基础。