电转移中蛋白质的透膜现象及其对蛋白质印迹结果的影响

被引：25

作者：

董燕

张枫

梅柱中

刘斌

孙志贤

不详

机构：

[1] 军事医学科学院放射医学研究所

[2] 军事医学科学院放射医学研究所北京

[3] 北京

来源：

生物化学与生物物理进展 | 2002年 / 03期

关键词：

蛋白质; 电转移; 免疫印迹;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q503 [生物化学技术];

学科分类号：

070307 [化学生物学];

摘要：

探讨了电转移中蛋白质的透膜现象及其对蛋白质印迹结果的影响 .采用抗凋亡抑制蛋白 Survivin的抗体 ,对细胞裂解液进行蛋白质印迹 .与常规操作方法不同之处是 :在电转移的凝胶“三明治”中 ,重叠放置两张硝酸纤维素膜 .电转移后 ,对两张膜同时进行免疫印迹 .在特定的转移条件下 ,两张膜的免疫印迹都出现了Survivin蛋白的特异印迹带 ,证实了电转移中存在着蛋白质的透膜现象 .转移时间、电流强度和蛋白质的分子质量 ,都是影响蛋白质透膜的相关因素 .电转移中蛋白质的透膜 ,可以产生“印迹复制失真”的效应 ,从而最终影响蛋白质印迹定性和定量的结果 .所得实验结果和结论 ,揭示了蛋白质印迹技术方法学中一个需要加以充分关注的问题 ,对于科学掌握和应用该技术具有积极作用

引用

页码：449 / 453

页数：5