大麦黄矮病毒(BYDV)cDNA的合成、克隆及初步应用

被引:7
作者
成卓敏
W.L.Gerlack
P.M.Waterhouse
W.A.Miller
周广和
王立阳
机构
[1] 中国农业科学院植物侏护研究所
[2] 澳大利亚联邦科工组织植物研究所
[3] 中国农业科学院植物保护研究所
关键词
cDNA; 病毒核酸; BYDV)cDNA; 大麦黄矮病毒; 病毒株; 重组质粒;
D O I
10.13926/j.cnki.apps.1988.01.006
中图分类号
学科分类号
摘要
以大麦黄矮病毒二叉蚜和麦长管蚜专化株的病毒核酸为模板,以小牛胸腺DNA为引物,合成cDNA的第一条链,再用缺口翻译法合成第二条链,然后采用加装BamH1人工接头的方法将ds-cDNA插入到质粒载体pUC8中,重组质粒于大肠杆菌JM—83中进行克隆,以克隆的颜色变化选择含有外源DNA的克隆,再用病毒核酸制备的探针筛选真正病毒cDNA插入的克隆。重组质粒中ds-DNA的插入长度在300—1600bp之间。用缺口翻译法制备质粒DNA分子探针检测同源病毒液,反应灵敏度在100pg-1ng之间。应用cDNA探针检测不同病毒和病毒株系,从中筛选出黄矮病毒株系专化克隆系,黄矮病毒专化克隆系和黄矮病毒组专化克隆系.
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