目的:建立HPLC法同时测定车前草中大车前苷、毛蕊花糖苷、木通苯乙醇苷B和木犀草苷含量的方法。方法:采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;柱温30℃;流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸溶液(B),梯度洗脱;流速1.0 mL/min;检测波长330 nm。并采用聚类分析和主成分分析对两种基原车前草进行比较。结果:在上述色谱条件下,大车前苷、毛蕊花糖苷、木通苯乙醇苷B和木犀草苷获得良好分离;质量浓度分别在2.29~458μg/mL(r1=0.9999)、2.65~530μg/mL(r2=0.9999)、1.35~270μg/mL(r3=0.9999)、1.60~320μg/mL(r4=0.9999)范围内呈良好的线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为98.84%、98.97%、98.94%、99.34%。比较发现两种基原车前草中4种成分差异明显,聚类分析和主成分分析可以将两者分开。结论:该方法简便、准确,重复性好,可为车前草的质量控制提供实验依据。