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人酸性成纤维细胞生长因子在大肠杆菌的高效表达
被引：9
作者：
刘青
万敏
卫红飞
吴秀丽
张培因
王燕媚
杨翰仪
王丽颖
机构：
[1] 吉林大学第一医院内分泌科,吉林大学基础医学院分子生物学教研室,吉林大学基础医学院分子生物学教研室,吉林大学基础医学院分子生物学教研室,吉林大学基础医学院分子生物学教研室,吉林大学基础医学院分子生物学教研室,吉林大学基础医学院生物化学教研室,吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林长春,吉林长春,吉林长春,吉林长春,吉林长春,吉林长春,吉林长春,吉林长春
来源：
关键词：
成纤维细胞生长因子1/分析;
大肠杆菌;
重组,遗传;
聚合酶链反应;
D O I：
10.13481/j.1671-587x.2004.01.001
中图分类号：
Q785 [转化及克隆];
学科分类号：
071010 [生物化学与分子生物学];
摘要：
目的 :探讨人酸性成纤维细胞生长因子 (acidic fibroblast growth factor,a FGF)在大肠杆菌中高效表达的方法及重组人 a FGF的生物学活性。方法 :1通过 PCR法扩增人 a FGF引入点突变 ,对其密码子进行改造 ;2构建 a FGF- p ET- 2 8a重组质粒并在大肠杆菌 BL2 1 (DE3)中表达 ;3重组蛋白的纯化及生物学活性研究。结果 :通过 PCR扩增 ,将设计的核酸水平突变引入到 a FGF DNA中 ,使其自起始密码 ATG后的前 5 0个碱基均为原核细胞偏爱密码子、并保持原氨基酸序列不变 ,成功地实现了重组人 a FGF在大肠杆菌中的高效表达 ,并通过降低培养温度使大肠杆菌中可溶性目的蛋白的含量大幅增加 ,原核表达的 a FGF亦具有天然生物学活性。结论 :通过对 a FGF DNA碱基进行改造 ,可大幅度提高 a FGF在大肠杆菌中的表达量 ,且目的蛋白具有良好的生物学活性
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