链延伸反应提高压电基因传感器的灵敏度的实验研究

被引:1
作者
陈鸣
府伟灵
刘明华
张波
蒋天伦
俞凡
陈小兵
机构
[1] 第三军医大学附属西南医院检验科
[2] 信息产业部电子第研究所
[3] 信息产业部电子第研究所 重庆
[4] 重庆
关键词
基因传感器; 金黄色葡萄球菌; DNA; 灵敏度;
D O I
10.16016/j.1000-5404.2002.01.011
中图分类号
R446.9 [其他];
学科分类号
100208 ;
摘要
目的 利用链延伸反应的原理延长引物链以提高压电基因传感器表面的质量负载 ,从而提高传感器的灵敏度。方法 基因传感器阵列表面分别固定上金黄色葡萄球菌mecA及femA两种探针片段 ,待杂交上相应的靶序列片段后 ,加入Klenow酶 ,室温下 (2 0℃左右 )进行链延伸反应 8h。结果  50nmol L单链mecA在杂交反应及链延伸反应的过程中 ,频率的下降值分别为 (99.2± 8.5)Hz、(1 92 .9± 1 3 .3 )Hz。而femA则分别下降了 (1 42 .4± 1 1 .2 )Hz、(2 2 2 .6± 1 6.6)Hz。mecA、femA在链延伸反应前的检测灵敏度为 0 .5nmol L ,但经链延伸反应后检测灵敏度提高到了 0 .0 5nmol L。结论 链延伸反应有效地提高了压电基因传感器的灵敏度 ,可用于微量DNA的检测、核酸同源性分析等方面
引用
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共 2 条
[1]   临床细菌学检验面临的挑战 [J].
周惠平 .
中华医学检验杂志, 1999, (01) :11-13
[2]  
Biosensors as new analytical tool for detection of Genetically Modified Organisms (GMOs)[J] . M. Minunni,S. Tombelli,E. Mariotti,M. Mascini.Fresenius’ Journal of Analytical Chemistry . 2001 (7-8)