用于PCR扩增的细菌DNA提取方法比较

被引：116

作者：

冯广达

陈美标

羊宋贞

朱红惠

机构：

[1] 广东省微生物研究所/广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室

来源：

华南农业大学学报 | 2013年 / 34卷 / 03期

基金：

广东省科技计划; 广东省自然科学基金;

关键词：

DNA提取; 冻融法; 16S rRNA基因; PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q503 [生物化学技术]; Q93-31 [微生物研究法];

学科分类号：

070307 [化学生物学]; 071005 [微生物学];

摘要：

以14个属的革兰阴性菌和阳性菌为研究对象,采用16S rRNA基因PCR扩增对4种细菌DNA提取法进行了比较.结果表明,对细菌DNA的提取效果排序,依次为冻融法、煮沸法、碱解法、ROSE法.冻融法效果最好,具有成本低、省时省力、无污染等优点,但仍存在少数革兰阳性菌DNA提取失败的现象.因此,在菌株较多的情况下可先采用冻融法提取细菌DNA,对少数提取失败的菌株,弃冻融法得到的上清液,再以SDS法、CTAB法或DNA试剂盒的提取进行补充.采用该操作流程既能节省成本和时间,又减少了提取过程中有机废弃物的产生.

引用

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页数：4

共 5 条

[1]

具有ACC脱氨酶活性的麻疯树根际促生菌(PGPR)的分离筛选及系统发育分析 [J].