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人胰高血糖素样肽-1 cDNA的克隆与表达
被引：12
作者：
张志珍
毛积芳
窦鸿
杨生生
机构：
[1] 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室!上海,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室!上海,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室!上海,第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室!上海
来源：
关键词：
胰高血糖素样肽-1;
克隆,分子;
基因表达;
糖尿病;
D O I：
10.16781/j.0258-879x.2001.04.007
中图分类号：
R341 [];
学科分类号：
摘要：
目的 :克隆人胰高血糖素样肽 - 1(h GL P- 1) c DNA,构建原核表达质粒 p GEX- 4T- 3/ h GL P- 1c DNA,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶 - h GL P- 1(GST- h GL P- 1)融合蛋白。方法 :采用亚磷酸二酯法合成 6个 h GL P- 1c DNA的寡核苷酸片段 ,拼接成完整的 h GL P- 1c DNA ,克隆至 p BS SK(+ / - )载体中 ,经双酶切鉴定和测序后把 h GL P- 1c DNA定向插入融合基因表达载体 p GEX- 4T- 3的多克隆位点上 ,构建重组质粒 p GEX- 4T- 3/ h GL P- 1c DNA,并转化大肠杆菌 TG1。 结果 :经限制性内切酶Bam H 、Xho 酶切和电泳 ,证明 h GL P- 1c DNA已插入到 p GEX- 4T- 3中并诱导表达出融合蛋白。结论 :成功诱导表达出融合蛋白 GST- h GL P- 1,为进一步获得大量可供实验研究和临床应用的重组 h GL P- 1创造条件。
引用
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页码：316 / 318
页数：3
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