抗RalB单克隆抗体的制备及初步应用

被引：2

作者：

潘华政 ^{[1
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黄湘 ^{[1
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姚小艳 ^{[1
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王穗海 ^{[1
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杜红岩 ^{[1
]}

季朝能 ^{[2
]}

李明 ^{[1
]}

机构：

[1] 南方医科大学生物技术学院

[2] 复旦大学生命学院遗传所

来源：

四川大学学报(医学版) | 2008年 / 04期

关键词：

RalB蛋白; 单克隆抗体; 真核细胞; 表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

R392 [医学免疫学];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的制备抗Ras相关蛋白RalB的单克隆抗体(McAb),探讨RalB蛋白在哺乳动物真核细胞中的表达,为进一步研究RalB功能奠定基础。方法以纯化的原核表达RalB蛋白免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗RalB蛋白的McAb的杂交瘤细胞株。通过免疫组织化学方法和Western-blot方法分别对RalB在组织中的表达及特异性进行鉴定。结果获得2株能高效分泌特异性McAb的抗RalB的杂交瘤细胞系F001,F002,其免疫球蛋白亚类均为IgG1。免疫组织化学实验结果表明RalB定位于肝癌细胞的细胞膜,Western-blot显示RalB在不同的肝癌细胞及正常肝细胞中均有表达。结论成功获得抗RalB的特异性的单克隆抗体,为进一步研究RalB与肿瘤的相关功能研究创造了条件。

引用

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页码：651 / 653+670 +670

页数：4

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共 3 条

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