人微小病毒B19 VP1基因原核表达克隆的构建

被引:2
作者
于红
张文卿
王斌
丁守怡
王海青
机构
[1] 青岛大学医学院微生物学教研室
关键词
细小病毒B19,人; 基因,VP1; 原核表达;
D O I
暂无
中图分类号
R346 [];
学科分类号
摘要
①目的 构建人微小病毒B19VP1基因的原核高效表达系统。②方法 通过PCR扩增B19病毒主要抗原决定簇VP1区段基因 ,将目的基因克隆到原核表达载体pGEX 4T 2上 ,IPTG诱导表达融合蛋白 ,产物经亲和层析初步纯化 ,以Western Blot进行鉴定 ,并包被ELISA板 ,对临床血清进行检测。③结果 pGEX 4T 2 VP1可在大肠杆菌中高效表达 ,表达产物经纯化后可得单一目的蛋白条带。ELISA结果表明 ,其灵敏度、特异度等指标与德国Virion试剂盒有较好的符合率。④结论 该重组蛋白具有良好的抗原性 ,为研制和开发具有我国独立知识产权的B19病毒基因工程抗原ELISA诊断试剂盒提供了有价值的资料
引用
收藏
页码:117 / 120
页数:4
相关论文
共 1 条
  • [1] 分子克隆实验指南[M]. 科学出版社 , (美)J.萨姆布鲁克(J.Sambrook)等著, 1992