p21 WAF1/CIP1基因导入对p53突变人肺癌细胞系生长特性的影响

目的　探讨含突变ｐ５３ 基因癌细胞系表达ｐ２１ 基因的抗肿瘤作用。方法　构建人ｐ２１表达重组子，导入ｐ５３ 基因突变的人肺癌ＰＧ细胞系，建立稳定高表达ｐ２１ 的细胞系；然后观察其形态及生长特性的改变；ＣＤＫ４ ，ＰＣＮＡ水平；对基因毒性物的反应性。结果　在含ｐ５３ 基因突变的ＰＧ 细胞内导入外源性ｐ２１ 基因，其高表达ｐ２１ 约是ＰＧ 细胞的６ 倍；转染细胞出现核规则、核膜变薄等异型性降低；生长速度下降（５０％ ） ，叠落生长不明显；在０ ．５％ 血清条件下生长显著低于对照组；血清依赖性升高；软琼脂集落实验：转染细胞集落形成率降低为１ ％ （ 对照组为２８％ ） 。ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 显示，ｐ２１ 转染细胞的ＣＤＫ４ 和核仁组成区相关蛋白水平显著降低。但顺铂诱导下转染细胞凋亡发生延缓至４８ 小时以后（ 对照组２４ 小时）。结论　在有ｐ５３ 基因突变的肿瘤细胞ｐ２１ 的高表达仍能抑制癌细胞的生长，降低恶性表型；其作用可能与降低细胞ＣＤＫ４ 和ＰＣＮＡ 水平有关，而不依赖细胞凋亡机制。表达ｐ２１ 基因可作为恢复ｐ５３ 基因功能的旁路途径。