硫酸氨基葡萄糖对白细胞介素1β诱导人骨关节炎软骨细胞合成前列腺素E2的影响

目的探讨硫酸氨基葡萄糖（glucosamine sulfate,GS）对白细胞介素1β（IL-1β）诱导体外培养的人骨关节炎软骨细胞（human osteoarthritic chondrocyte,HOC）合成前列腺素E2 （prostaglandin E2,PGE2）的影响及其作用机制。方法取10例骨关节炎患者行全膝关节置换术的股骨髁和胫骨平台软骨标本,酶消化法获取软骨细胞进行体外培养。在原代或第二代的HOC培养液中加入IL-1β(5×10-3μg/L)和不同浓度的GS（0.2、2和20 mmol/L）作用24 h（对照组不加IL-1β和GS）,首先应用ELISA法检测GS对IL-1β诱导HOC合成PGE2的影响,然后采用RT-PCR法和Western蛋白印迹法分别检测其对IL-1β诱导HOC表达COX-2 mRNA和蛋白的影响。结果对照组HOC培养液中PGE2浓度为（109.46±17.48）pg/ml,IL-1β刺激后软骨细胞合成PGE2为（3607.22±239.34）pg/ml,其差异有统计学意义（P<0.01）。0.2、2和20 mmol/L GS以浓度依赖的方式抑制IL-1β诱导HOC合成PGE2（P<0.05）,其浓度分别为（2594.23±185.18）、（1057.53±126.81）和（565.43±52.79）pg/ml;单独使用20 mmol/L GS时软骨细胞合成PGE2为（169.94±30.03）pg/ml,与对照差异无统计学意义（P>0.05）。IL-1β刺激后,HOC表达COX-2 mRNA和蛋白上调（P<0.01）,GS能以浓度依赖的方式抑制IL-1β诱导HOC表达COX-2 mRNA和蛋白上调（P<0.01）。结论GS抑制HOC在IL-1β诱导下分泌炎性介质PGE2,其机制是下调调控它们表达的COX-2 mRNA和蛋白的表达;这可能是GS既能缓解症状和又能保护软骨的机制之一。